دانلود مطالب پایان نامه ها با موضوع بررسی ارتباط بین ...
-
-
-
-
-
- اندازه‌گیری هورمون LH در سرم
-
-
-
-
قبل از شروع آزمایش، اطمینان حاصل می‌کنیم که کلیه‌ی استانداردها، معرف‌ها و نمونه‌ها، به دمای اتاق (۲۸-۲۲ درجه‌ی سانتی‌گراد) رسیده‌اند. کلیه استانداردها را با سر و ته کردن، به‌آرامی مخلوط می‌کنیم.
-
-
- تعداد چاهک‌های مورد نیاز برای انجام آزمایش را برداشته و بقیه‌ی چاهک‌ها را با چسب مخصوص پلیت می‌پوشانیم و همراه رطوبت‌گیر در کیسه‌ی آلومینیومی قرار داده، در آن را بسته و در دمای ۸-۲ درجه‌ی سانتی‌گراد نگه می‌داریم.
(( اینجا فقط تکه ای از متن درج شده است. برای خرید متن کامل فایل پایان نامه با فرمت ورد می توانید به سایت feko.ir مراجعه نمایید و کلمه کلیدی مورد نظرتان را جستجو نمایید. ))
-
- ۵۰ میکرولیتر از استاندارد و نمونه در چاهک‌های مورد نظر می‌ریزیم. بهتر است که از هر نمونه یا استاندارد به صورت دوتایی (Duplicate) در چاهک‌ها ریخته شود.
توجه: حتماً چاهک اول به عنوان بلانک در نظر گرفته شود. در این چاهک، نمونه و یا استاندارد نمی‌ریزیم. بقیه‌ی مراحل با سایر چاهک‌ها یکسان می‌باشد.
- ۱۰۰ میکرولیتر از محلول آنزیم کونژوگه (Enzyme Conjugate) به هر چاهک اضافه کنید. برای مدت ۳۰ ثانیه پلیت را روی سطح میز به‌آرامی تکان می‌دهیم.
- چاهک‌ها را با چسب مخصوص پلیت می‌پوشانیم و به مدت ۶۰ دقیقه (± ۱۰ دقیقه) در دمای اتاق انکوبه می‌کنیم.
- محتویات چاهک‌ها را با وارونه کردن پلیت یا آسپیره کردن خارج می‌کنیم. سپس چاهک‌ها را ۵ مرتبه و هر مرتبه با ۳۰۰ میکرولیتر محلول شستشو می‌شوییم. اگر شستشو به صورت دستی انجام شود در انتهای شستشو به‌آرامی پلیت را بر روی دستمال رطوبت‌گیر می‌زنیم.
- ۱۰۰ میکرولیتر از محلول آماده بکار رنگزا درون تمام چاهک‌ها می‌ریزیم.
- مدت ۱۵ دقیقه در دمای اتاق و تاریکی پلیت را انکوبه می‌کنیم.
- ۵۰ میکرولیتر محلول متوقف‌کننده‌ی واکنش به کلیه‌ی چاهک‌ها اضافه می‌کنیم. به مدت ۲۰ ثانیه به‌آرامی پلیت را تکان داده تا تمام رنگ آبی آن به زرد تبدیل شود.
- مقدار جذب نور را برای هر چاهک در طول موج ۴۵۰ نانومتر (از طول موج و فرکانس ۶۳۰-۶۲۰ نانومتر استفاده می‌کنیم) با بهره گرفتن از روش Point to Point حداکثر تا ۱۵ دقیقه بعد از متوقف کردن واکنش می‌خوانیم.
جدول ۳-۲- مقادیر مورد انتظار برای سیستم تست LH به روش ELISA
Normal Range
۰٫۸-۱۰٫۸ mlu/ml
Follicular Phase Female
۱۷-۶۵ mlu/ml
Midcycle Peak Female
۰٫۸-۱۱٫۵ mlu/ml
Luteal Phase Female
۸٫۱-۴۲ mlu/ml
Postmenopasual Female
۰٫۸-۷٫۸ mlu/ml
Male
